Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - Коллектив авторов

сульфаниловой кислоты растворяют в 500 мл 30%– ной уксусной кислоты; II – 2,5 г α-нафтиламина растворяют в 500 мл 30%-ной уксусной кислоты. Оба раствора хранят в защищенном от света месте.

Непосредственно перед исследованием оба раствора смешивают в равных количествах, 1 мл смеси добавляют к 1 мл мочи. Появление красного окрашивания свидетельствует о присутствии в 1 мл мочи не менее 105 микробных клеток.

ТТХ-тест

Трифенилтетразолия хлорид (ТТХ) под действием продуктов жизнедеятельности микроорганизмов переходит из бесцветного в красный не растворяющийся в воде трифенилформазан. Интенсивность окраски находится в прямой зависимости от степени бактериурии.

Готовят три раствора: I – насыщенный раствор двузамещенного фосфата натрия; II – 750 мл ТТХ растворяют в 100 мл раствора I; III – рабочий раствор: 4 мл раствора I смешивают со 100 мл раствора II. Хранят растворы в прохладном, защищенном от света месте. Срок хранения растворов I и II – до 2 месяцев, рабочего раствора – не более 2 недель.

При постановке реакции пользуются стерильной посудой.

К 2 мл мочи прибавляют 0,5 мл рабочего раствора и помещают после перемешивания в термостат при температуре 37 °С. После 4-часовой инкубации учитывают результаты. Появление на дне пробирки красного осадка свидетельствует о наличии в 1 мл мочи не менее 105 микробных клеток.

Ускоренные методы позволяют дать немедленный ответ. При использовании бактериологических методов лаборатория дает предварительный ответ через день после получения результатов определения степени бактериурии и окончательный – через 3–4 дня после выделения микроорганизмов, их идентификации и определения чувствительности к антибактериальным препаратам. В окончательном ответе указывают степень бактериурии, вид выделенных культур, их чувствительность к лекарственным веществам.

Оценка результатов

Основная задача при интерпретации полученных данных заключается в доказательстве этиологической роли микроорганизмов, выделенных из мочи. Учитывают комплекс тестов: степень бактериурии, вид выделенных культур, повторность их выделения в процессе заболевания, присутствие в моче монокультуры или ассоциации микроорганизмов.

Степень бактериурии позволяет дифференцировать инфекционный процесс в мочевых путях с контаминацией мочи с нормальной микрофлорой.

Оценку производят на основании следующих критериев:

1) степень бактериурии, не превышающая 103 КОЕ/мл мочи, свидетельствует об отсутствии воспалительного процесса и обычно является результатом контаминации мочи;

2) степень бактериурии, равная 104 КОЕ/мл, расценивается как сомнительный результат. Исследование следует повторить;

3) степень бактериурии, равная и выше 105 КОЕ/мл мочи, указывает на наличие воспалительного процесса.

Изменение степени бактериурии в процессе заболевания может быть использовано для контроля над течением процесса и эффективностью терапии: уменьшение степени бактериурии свидетельствует о благоприятном течении заболевания и эффективности использованных лекарственных препаратов.

В некоторых случаях у больных, получающих антибактериальную терапию, при плохом оттоке мочи, при ее низкой относительной плотности и рН ниже 5,0 может наблюдаться низкая степень бактериурии при имеющемся заболевании. Поэтому, помимо степени бактериурии, следует учитывать вид выделенных из мочи микроорганизмов.

Эшерихии, протей, синегнойная палочка, клебсиеллы чаще выделяются из мочи больных уроинфекцией. Дифтероиды, лактобациллы и другие грамположительные палочки обычно выделяются из мочи здоровых людей. Повторное выделение из мочи культуры одного вида, типа, варианта свидетельствует об инфекционном процессе.

Монокультура чаще выделяется при острых воспалительных процессах и коррелирует с высокой степенью бактериурии. Ассоциации микроорганизмов чаще встречаются при хронических процессах.

При окончательной оценке результатов микробиологического исследования мочи необходимо учитывать данные клиники и другие лабораторные анализы.

Бактериоскопическое исследование мочи с целью обнаружения туберкулезных микобактерий

Утреннюю порцию мочи собирают в стерильную посуду, отстаивают в течение 1–2 ч. Образовавшийся осадок собирают пипеткой в центрифужную пробирку, центрифугируют. Из осадка приготовляют препараты, хорошо высушивают (плохо высушенные препараты сползают при окраске), фиксируют и красят по Цилю—Нильсену.

Окраска по Цилю—Нильсену

Необходимые реактивы

1. Карболовый фуксин (1 г основного фуксина растворяют в 10 мл этилового спирта, раствор выливают в 100 мл 5%-ного раствора карболовой кислоты).

2. 3%-ный спиртовой раствор соляной кислоты (3 мл соляной кислоты и 97 мл этилового спирта).

3. Водный 0,5%-ный раствор метиленового синего.

Ход окраски

На препарат кладут кусочек фильтровальной бумаги и наливают раствор карболового фуксина. Препарат нагревают над пламенем горелки до появления паров, охлаждают и снова нагревают (3 раза). Дают остыть, сбрасывают фильтровальную бумагу. Опускают препарат в солянокислый спирт для обесцвечивания. Обесцвечивают до полного отхождения краски. Промывают водой. Докрашивают препарат метиленовым синим в течение 20–30 с. Промывают водой и высушивают на воздухе. Микроскопируют с иммерсионной системой.

Туберкулезные микобактерии окрашиваются в красный цвет, все остальные элементы мочи и бактерии – в синий. Туберкулезные микобактерии имеют вид тонких, слегка изогнутых палочек различной длины, с утолщениями на концах или посередине, располагаются группами и поодиночке.

Анализаторы мочи

Анализаторы мочи лабораторные. Полуавтоматические, автоматические и применяемые у постели больного. Применяются для качественного или количественного определения химических и клеточных компонентов в клиническом образце мочи. Спектр данных включает в себя билирубин, гемоглобин, глюкозу, кетоны, нитраты, белок, pH, удельную плотность, уробилиноген, кровь, эритроциты, лейкоциты, соли, цилиндры, сперматозоиды, микроорганизмы (в частности, бактерии). Принцип работы основан на технологии, в которую могут быть включены электрический импеданс, электропроводность, ферментная спектрофотометрия, нефелометрия, фотометрия.

Глава 8

Исследование кала

Макроскопические и микроскопические исследования фекальных масс заслуживают большого внимания главным образом у больных с заболеваниями пищеварительного тракта. Перед тем как говорить об этих исследованиях как таковых, следует прежде всего обратить внимание на некоторые меры, которые в целях правильно проводимых исследований должны обязательно соблюдаться. Результаты исследования зависят от правильной подготовки больного и от правильного сбора, хранения и доставки материала исследования.

Подготовка больного к исследованию

Перед исследованием надо отменить больному медикаменты, прием которых мешает микроскопическому исследованию и которые влияют на внешний вид каловых масс, а также усиливают перистальтику кишечника. К этим лекарствам относятся все слабительные, ваго– и симпатикотропные средства, каолин, бария сульфат, препараты висмута, железа и препараты, вводимые в ректальных свечах, приготовленных на жидкой основе. В течение соответствующего периода следует избегать различных физиотерапевтических процедур в области живота, так как при этом может произойти изменение состава стула. Если целью исследований является обнаружение скрытых кровотечений, то в предшествующие анализу 3 дня следует избегать пищи, содержащей пищевые продукты, которые наравне с кровью могут быть катализаторами в реакциях, направленных на ее обнаружение. К этим продуктам относятся мясо, рыба, все виды зеленых овощей. При исследовании, основной целью которого является изучение степени усвоения пиши, целесообразно применять диеты, содержащие точно дозированные определенные продукты. Наибольшее распространение получили диеты Шмидта и Певзнера.

Диета Шмидта является щадящей:

1) утром 0,5 л молока, чая или какао, белый хлеб