Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - Коллектив авторов

кишечной флоры, представленной главным образом возбудителями из семейства энтеробактерий (сальмонеллами, шигеллами, коли, протеем и т. д.), а также некоторыми видами стафилококка, стрептококка (энтерококка), клостридиума, энтероколитика и т. д., требует продолжения бактериологического исследования с последующим выделением возбудителей. В этих целях из пробы осуществляются засевы (копрокультура) на обогащенные питательные среды (среду Мюллера—Кауфмана, среду, содержащую селенит натрия, жидкую питательную среду Шапмана и т. д.) или на некоторые селективные среды (среду Вильсона—Блера, среду Истрата—Майтерта, среду, содержащую теллурит натрия, и т. д.).

Химическое исследование кала

Определение реакции кала (рН)

Лакмусовая бумага после контакта с фекальными массами изменяет свой цвет в зависимости от концентрации в них Н+-ионов. Для проведения реакции необходимы следующие материалы: универсальная лакмусовая бумага для измерения рН от 1,0 до 10, 0 или два вида лакмусовой бумаги (синяя и красная).

Лакмусовую бумагу, предварительно смоченную дистиллированной водой, прикладывают к нескольким местам поверхности испражнений; результат определяют спустя 2–3 мин, сравнивая изменение окраски на поверхности лакмусовой бумаги с различными оттенками контрольной шкалы.

Если пользуются красной и синей лакмусовой бумагой, то результаты учитывают следующим образом: при кислой реакции кала синяя бумага краснеет, а красная не изменяет своего цвета; при щелочной реакции красная лакмусовая бумага синеет, а синяя остается без изменения; при нейтральной реакции оба вида бумаги не меняют своего цвета.

В нормальных условиях кал имеет нейтральную или слабощелочную реакцию. Реакция кала преимущественно зависит от жизнедеятельности микробной флоры кишечника; в результате угнетенной жизнедеятельности бактерий, расщепляющих белки, образуется много аммиака, придающего среде щелочную реакцию. Продуктами жизнедеятельности бродильной флоры являются СО2 и органические кислоты, создающие кислую реакцию среды. Активация бродильной флоры связана с усилением перистальтики толстой кишки, а процессы гниения усиливаются чаще при разложении белков, выделяемых ее стенкой (клетки, воспалительный экссудат). Таким образом, основа бродильной диспепсии – чаще энтериты, а гнилостной – колиты.

Определение крови в кале

Обычно у здорового человека скрытая кровь в кале отсутствует. Анализ производится с применением различных скрининговых тестов. Для этого используется бензидиновая или гваяковая пробы. Обычно назначается подготовка больного перед взятием крови для иключения ложноположительных результатов. За трое суток до обследования из рациона питания исключаются мясные продукты, фрукты и овощи, содержащие каталазу и пероксидазу (хрен, огурцы, цветная капуста), отменяют аскорбиновую кислоту, препараты железа, ацетилсалициловую кислоту, нестероидные противовоспалительные средства.

Рекомендуется исследовать кал после трех последовательных дефекаций, пробы берут каждый раз из двух разных мест каловых масс. Диагностически значимым является даже один положительный результат.

Бензидиновая проба. Применяются следующие реактивы: 1%-ный раствор бензидина в 50%-ной уксусной кислоте (при хранении в посуде из темного стекла годен в течение нескольких дней с условием ежедневного контроля), 3%-ный раствор Н2О2.

Неразведенный кал тонким слоем наносят на предметное стекло. Мазок кладут в чашку Петри, лежащую на белом фоне, и наносят на него 2–3 капли раствора бензидина и столько же перекиси водорода. При положительной реакции появляется зеленое или синее окрашивание. Интенсивность окраски пропорциональна количеству крови в испражнениях. Если окраска не развивается или появляется позже 2 мин, то проба считается отрицательной. Бензидиновая проба является наиболее чувствительной и дает положительный результат в разведении крови 1 : 100 тыс. – 1 : 250 тыс. В настоящее время этот тест практически не используется, так как дает много ложноположительных результатов и выявляет кровопотери, превышающие 15 мл в сутки.

В клинической практике часто применяется гваяковая проба.

Гваяковая проба. Применяются следующие реактивы: 2%-ная спиртовая настойка гваяковой смолы, ледяная уксусная кислота, 3%-ный раствор Н2О2.

На предметное стекло, помещенное в чашку Петри, кладут кусок фильтровальной бумаги, на которую наносят небольшое количество кала в виде мазка. На кал капают 2–3 капли ледяной уксусной кислоты, настойки гваяковой смолы и перекиси водорода. В присутствии крови появляется сине-зеленое или фиолетовое окрашивание. Проба с гваяковой смолой дает положительный результат с разведениями крови 1 : 50 тыс. В настоящее время разработаны тесты, в которых гваяковый реагент нанесен на пластмассовую полоску. Это привело к возможности стадартизировать проведение исследований и диагностировать мелкие кровотечения. Тест становится положительным при концентрации Нb в кале более 2 мг в 1 грамме. Гваяковый тест выявляет скрытую кровь при раке толстой кишки, колоноректальном раке, полипах толстой кишки.

Пирамидоновая проба. Применяются следующие реактивы: 5%-ный спиртовой раствор амидопирина (пирамидона), 3%– ный раствор уксусной кислоты, 3%-ный раствор Н2О2.

Небольшой кусочек кала растирают с 4–5 мл воды и фильтруют. К фильтрату добавляют равный объем раствора амидопирина и по 10–12 капель уксусной кислоты и перекиси водорода. В присутствии крови появляется сине-фиолетовое окрашивание. Если через 2 мин окраска не появилась, то проба считается отрицательной. Проба с амидопирином по чувствительности стоит между описанными выше.

Экспресс-тесты. Фирмы «Germed» (ФРГ), «Roham Pharma» (Чехия), «Smith Klein» (США) выпускают бумажные тесты для определения скрытой крови в испражнениях, которые основаны на пробе с гваяковой смолой.

Испражнения наносят на пропитанную гваяковой смолой фильтровальную бумагу, укрепленную на дне небольшого окошка, прорезанного в картонной пластине, и закрывают створкой. С противоположной стороны также имеется створка, которую открывают непосредственно при исследовании, и на фильтровальную бумагу, которая уже пропитана испражнениями, наносят 2–3 капли реактива, в который входят кислота и перекись водорода. При наличии крови на фильтровальной бумаге развивается сине-зеленое окрашивание. Определение крови подобным тестом не ускоряет исследования, но позволяет проводить его у постели больного и значительно упрощает транспортировку испражнений при необходимости исследования только крови.

В последние годы для ранней диагностики рака толстой кишки применяются иммунохимические тесты с использованием специфических антител к гемоглобину человека (наборы типа «Гемоселект» и др.). Они положительные в 97% случаев рака толстой кишки и 60% при аденоматозе (при полипах размером более 1 см).

Определение желчных пигментов (стеркобилина, билирубина)

У здорового человека выводится с калом от 250 до 320 мг стеркобилина в сутки. Он придает калу определенную окраску, при его отсутствии кал обецвечен.

Унифицированный метод с двухлористой ртутью (проба Шмидта)

В результате реакции стеркобилина с двухлористой ртутью образуется соединение, имеющее розовое окрашивание. Применяются следующие реактивы: раствор двухлористой ртути (HgCl2 – хлорид ртути, сумма), 70 г/л раствора.

Растворяют при кипячении, после охлаждения фильтруют.

Комочек кала величиной с лесной орех растирают в фарфоровой чашечке или пробирке с 3–4 мл раствора двухлористой ртути, закрывают крышкой или пробкой и оставляют при комнатной температуре в вытяжном шкафу на сутки. Контрольную пробу ставят так же, как опытную, но вместо двухлористой ртути берут воду. В присутствии стеркобилина в опытной