Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - Коллектив авторов
Шрифт:
Интервал:
Закладка:
Метод с применением треххлористого железа
Необходимые реактивы
1. Реактив Фуше — раствор треххлористого железа (FeCl3) 1 : 5 мл воды.
2. Концентрированная соляная кислота.
В стеклянный сосуд помещают 1 г фекальных масс, хорошо смешанных с 10 мл дистиллированной воды. Затем 5 мл из этой эмульсии фекальных масс смешивают с 5 мл концентрированной соляной кислоты и нагревают в течение 5 мин до 50 °С. После охлаждения в проточной воде к этой смеси добавляют 2–3 капли треххлористого железа. Реакция может регистрироваться немедленно – в присутствии стеркобилина появляется красная окраска.
Метод с применением ацетата цинка
Необходимый реактив
Насыщенный раствор ацетата цинка (10 г ацетата цинка в 100 мл этилового спирта).
В пробирке смешивают до полной однородности 2–3 г фекальных масс и 100 мл насыщенного спиртового раствора ацетата цинка. В эту смесь добавляют 2–4 капли спиртового раствора йода и затем смесь фильтруют. Спустя 24 ч реакция регистрируется: в присутствии желчных пигментов фильтрат приобретает зеленую окраску.
У взрослых людей неизмененный билирубин в кале может появиться при ускоренной перистальтике (билирубин не успевает восстановиться) и при подавлении жизнедеятельности бактерий кишечника приемом больших доз антибиотиков и сульфаниламидов. Нарушение поступления билирубина в кишечник при заболеваниях печени или механическом препятствии оттоку желчи в результате закупорки или сдавления общего желчного протока приводит к снижению или полному отсутствию стеркобилина в кале, что отражается на окраске испражнений. Полное отсутствие стеркобилина можно установить только при химическом исследовании. Усиленное желчеотделение, повышенный распад эритроцитов приводят к увеличению стеркобилина в кале. Установить это можно, исследуя количество стеркобилина, выделенное с каловыми массами за сутки.
Определение аммиака и аминокислот
Формалин с солями аммония образует гексаметилентетрамин; освобождаемые кислые радикалы солей аммония оттитровывают 0,1%-ным раствором щелочи в присутствии фенолфталеина.
Необходимые реактивы
1. 30%-ный раствор хлорида железа (FeCl3).
2. 1–2%-ный спиртовой раствор фенолфталеина.
3. Гидроксид кальция [Са(ОН)2] в порошке.
4. 0,1%-ная HCl.
5. Формалин, разведенный 1 : 2 и нейтрализованный 0,1%-ным раствором гидроксида натрия (щелочи).
Растирают 10 г кала, постепенно добавляя 90 мл дистиллированной воды. Затем переливают в колбу и при встряхивании добавляют 2 мл 30%-ного хлорида железа. Спустя 10 мин вносят 25 капель раствора фенолфталеина. В эту смесь добавляют 10 мл дистиллированной воды, в которой растворены 2 г гидроксида кальция, до появления красного окрашивания смеси. Через 10 мин смесь фильтруют и доводят до 100 мл дистиллированной водой. Смесь должна быть прозрачной; мутность появляется при излишке гидроксида кальция. 25 мл фильтрата выливают в колбу и нейтрализуют 0,1%-ной HCl до бледно-розовой окраски. Затем добавляют 5 мл формалина, после чего фильтрат обесцвечивается. Далее проводят тестирование 0,1%-ным раствором гидроксида Na до появления бледно-розовой окраски. Количество щелочи, прошедшей тестирование, умножают на 4, получая количество аммиака на 10 г кала.
В нормальных условиях количество аммиака в кале (в 10 г) соответствует приблизительно 4 мл 0,1%-ного раствора гидрата натрия. Количество аммиака в кале отражает интенсивность гниения в толстом кишечнике. Практически пищевой белок расщепляется и всасывается в тонкой кишке, а гнилостному распаду подвергается чаще белок, выделяемый стенкой толстого кишечника. Следовательно, увеличение аммиака в кале говорит о гиперсекреции и воспалительной экссудации в толстых кишках, но так как распад белка до аммиака требует длительного времени, то при учащенной дефекации его количество в испражнениях даже при колитах может быть нормальным.
Определение растворимой слизи
Муцин слизи осаждается уксусной кислотой. Применяются следующие реактивы: 5%-ный водный раствор ледяной уксусной кислоты. В пробирку к 2,5 мл 10%-ной водной суспензии каловых масс приливают 7,2 мл 5%-ной уксусной кислоты. Появление через 20 мин хлопьев и просветления жидкости говорит о присутствии нерастворимой слизи.
Нерастворимая слизь в кале свидетельствует о раздражении или воспалении верхних отделов толстого кишечника.
Бактериологические исследования
О бактериальной флоре ободочной кишки может быть получено достаточно сведений при помощи бактериального исследования фекальных масс. Если речь идет о больном, то в соответствующих фекальных массах могут быть обнаружены в избытке и возбудители, локализованные также и в более высоко расположенных сегментах кишечника.
Бактериальная флора стула является очень разнообразной и богатой. Согласно наблюдениям различных авторов первое место в составе флоры фекальных масс занимают B. bifidus, B. Lactus, а также и различные грамотрицательные анаэробные палочки из группы Bacteroides. Из бактериальной флоры фекальных масс в значительно меньшей пропорции обнаруживаются энтерококки (S. Faecalis), принадлежащие к роду Streptococcus, B. coli или Escherichia coli и некоторые виды из рода Clostridium (семейство Bacillaceae). Среди них особое значение имеет Escherichia coli (кишечная палочка), которая, хотя и входит в нормальную кишечную флору, может в определенных условиях превращаться в патогенный возбудитель. Наряду с этиологической ролью, которая принадлежит некоторым серологическим типам Escherichia coli в появлении эпидемических поносов у новорожденных, следует упомянуть, что этот возбудитель нередко является причиной некоторых кишечных заболеваний у взрослых лиц. Сходную в некоторой степени роль могут играть и другие возбудители, которые встречаются во флоре фекальных масс. Например, в род Proteus включаются виды P. Mirabilis и P. Rettgeri, которые могут путем чрезмерного размножения обусловливать различные первичные или вторичные (после антибиотиков) энтеропатии.
Пищеварительные расстройства, более или менее тяжелые, могут обусловливаться также и некоторыми видами Klebsiella Pseudomonas, Enterobacter и т. д.
Бактериологические исследования, осуществляемые с применением повторных копрокультур, производятся для выделения специфических возбудителей, а также и возбудителей, которые могут превращаться в патогенные (потенциально патогенные) возбудители.
Бактериологическое исследование требует большого внимания и совершенной техники работы в лаборатории.
Взятие проб
Это манипуляция, от которой весьма часто зависит правильный результат. Отбор проб должен осуществляться в тщательно очищенные среды, подвергшиеся стерилизации и герметически закрывающиеся. Обычно из спонтанно выделившегося стула следует отбирать пробы по 3–5 г фекальных масс, не смешанных с мочой.
В рамках общей подготовки больного к взятию пробы следует избегать назначения антибиотиков, по крайней мере за несколько дней до взятия проб. Засевы всегда следует производить после взятия пробы немедленно: существует возможность размножения присоединившейся микробной флоры в ущерб флоре и микробам, которые подлежат выявлению.
Если все же засевы нельзя произвести немедленно, отобранные пробы помещают в реципиент, содержащий стерильную консервирующую жидкость, состоящую из 250 мл глицерина, 750 мл дистиллированной воды и 5 г хлористого натрия.
Каждая проба должна иметь специальный ярлык, на котором отмечают вероятный диагноз и указывают, принимал ли больной антибиотики или подвергался ли
