Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - Коллектив авторов

Фильтруют, 1–2 мл фильтрата смешивают с равным объемом реактива Обермейра, прибавляют 0,5–1 мл хлороформа и осторожно перемешивают.

Если слой хлороформа окрашивается в синий или красный цвет, его отсасывают и добавляют к нему 2–3 капли тиосульфата натрия.

При положительной реакции окраска хлороформа не исчезает после добавления тиосульфата натрия. В норме реакция отрицательная.

Обнаружение фруктозы (проба Селиванова)

Принцип метода

При нагревании фруктозы с резорцином в кислой среде образуются соединения, окрашенные в красный цвет.

Необходимые реактивы

1. НСl, 1 моль/л.

2. Резорцин: 5 г в 1 л, 1 моль/л раствора НСl.

Ход исследования

К 2 мл мочи приливают 1 мл раствора резорцина и нагревают до закипания.

При положительной пробе развивается интенсивное красное окрашивание. В норме окраска не появляется.

Оценку пробы проводят в момент закипания, так как при длительном кипении окраска может развиться при наличии глюкозы. Пищевая нагрузка медом и фруктами может дать положительную пробу.

Обнаружение лактозы и мальтозы (проба Велька)

Принцип метода

Лактоза и мальтоза в щелочной среде при нагревании с аммиаком образуют окрашенные соединения.

Необходимые реактивы

1. Аммиак водный концентрированный.

2. Калий едкий, 200 г/л раствора.

Ход исследования

К 5 мл мочи приливают 2,5 мл аммиака и 0,2 мл раствора едкого калия. Нагревают на водяной бане в течение 30 мин при температуре 60 °С.

При положительной реакции на лактозу появляется коричневая окраска, а при наличии мальтозы – красная окраска. В норме окраска не развивается.

Обнаружение пентоз (проба Биаля)

Принцип метода

Пентозы с орцином и треххлористым железом при нагревании в кислой среде образуют окрашенные соединения.

Необходимые реактивы

1. 5-метилрезорцин (орцин).

2. НСl концентрированная.

3. Железо треххлористое (FeCl3 × 6Н2О), 100 г/л раствора.

4. Реактив Биаля: 1 г орцина растворяют в 500 мл соляной кислоты и добавляют 1 мл раствора треххлористого железа.

Ход исследования

Нагревают 1 мл мочи до кипения с 5 мл реактива Биаля.

При положительной пробе появляется яркая желто-зеленая окраска. В норме проба отрицательная.

Обнаружение глюкозы, фруктозы, пентозы, лактозы и мальтозы в моче может быть результатом врожденных ферментопатий, а лактоза и мальтоза могут быть обнаружены при нарушении их гидролиза в тонкой кишке.

Обнаружение гликозоаминогликанов (проба с метилтриметил-аммония бромидом)

Принцип метода

Метилтриметиламмония бромид (ЦТАБ) с гликозамино-гликанами образует в кислой среде белый осадок.

Необходимые реактивы

1. Лимонная кислота.

2. Едкий натр.

3. Цитратный буфер, 1 ммоль/л, рН 5,7: в небольшом количестве воды растворяют 210 г лимонной кислоты, добавляют 120 г едкого натра, растворяют, охлаждают и доливают водой до 1 л.

4. Раствор ЦТАБ, 25 г в 1 л цитратного буфера.

Ход исследования

К 5 мл мочи приливают 1 мл раствора ЦТАБ и в течение 30 мин наблюдают образование осадка. Пробу проводят при комнатной температуре, для исследования берут свежевыделенную мочу.

Проба считается положительной при образовании осадка. В норме проба отрицательная. Следует учитывать, что проба дает 40% ложноположительных результатов.

Определение кальция (проба Сулковича)

Высокое содержание кальция в моче может быть при гипервитаминозе D и гиперпаратиреозе.

Принцип метода

Ионы кальция со щавелевой кислотой образуют нерастворимую щавелевокислую соль.

Необходимые реактивы

1. Щавелевая кислота.

2. Аммония оксалат.

3. Уксусная кислота ледяная.

4. Реактив Сулковича: в 50 мл дистиллированной воды растворяют по 2,5 г щавелевой кислоты и оксалата аммония, добавляют 5 мл ледяной уксусной кислоты и доводят объем раствора до 150 мл.

Ход исследования

Смешивают по 0,5 мл мочи и реактива Сулковича. Через 1–2 мин оценивают степень помутнения.

Степень помутнения оценивают визуально:

– 0 – отсутствие помутнения;

– 1 – слабое помутнение;

– 2 – умеренное помутнение;

– 3 – значительное помутнение;

– 4 – резко выраженное помутнение.

О повышенном содержании кальция в моче свидетельствуют 3 и 4-я степени помутнения.

После выявления положительных результатов описанных тестов больной нуждается в тщательном обследовании с помощью точных количественных методов в специализированных учреждениях.

Бактериологическое и бактериоскопическое исследования мочи

Микробиологическое исследование мочи производят при воспалительных заболеваниях мочеиспускательных путей.

Наиболее частыми возбудителями воспалительных процессов мочевого тракта являются грамотрицательные бактерии: Е. coli, Proteus, Providencia, Enterobacter, Klebsiella, Psaeruginosa, Serratia, Streptococcus группы Д. Возбудителями могут быть также Staph. aureus, Staph. epidermidis, Candida albicans, Mycoplasma и другие микроорганизмы.

Взятие мочи для исследования

Микробиологическое исследование мочи нужно проводить до начала антибактериальной терапии.

После тщательного туалета наружных половых органов в стерильную посуду собирают среднюю порцию свободно выпущенной мочи в количестве 3–5 мл. Взятие мочи с помощью катетера связано с риском инфицирования мочевых путей, поэтому его желательно избегать. Катетеризацию производят только в случаях необходимости – если больной неспособен мочиться или для разграничения воспалительного процесса в почках и мочевом пузыре. С этой целью мочевой пузырь опорожняют и вводят в него 50 мл раствора, содержащего 40 мг неомицина и 20 мг полимиксина. Через 10 мин берут пробы мочи для исследования. При локализации процесса в мочевом пузыре моча остается стерильной, при инфекции в почках отмечается бактериурия.

Мочу можно получить от больного путем надлобковой пункции мочевого пузыря. Этот метод взятия мочи дает наиболее достоверные результаты исследования, однако имеется опасность инфицирования больного.

Микробиологическое исследование мочи надо проводить как можно быстрее после ее получения от больного, с тем чтобы избежать размножения находящихся в ней микроорганизмов. Размножение микробов в моче до начала анализа приводит к ложным результатам при количественном определении бактериурии и может дезориентировать в отношении возбудителя заболевания. Если немедленное исследование мочи невозможно, то ее следует хранить в холодильнике при температуре 4 °С не более суток.

Проведение исследования

Определяют степень бактериурии – количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл мочи методом секторных посевов мочи. Платиновой петлей диаметром 2 мм (вместимостью 0,005 мл) производят посев мочи – 3–4 штриха на сектор чашки Петри с простым агаром. Чашку инкубируют при температуре 37 °С в течение 18–24 ч, после чего подсчитывают число колоний, выросших в разных секторах.

Колонии, выросшие на плотной питательной среде, отсевают в пробирки со скошенным агаром, выделенную чистую культуру идентифицируют и определяют ее чувствительность к антибактериальным препаратам.

Ускоренные методы определения степени бактериурии основаны на определении продуктов метаболизма, образующихся при размножении микроорганизмов в моче. Они дают менее точные результаты, чем метод секторных посевов, и используются преимущественно при массовых профилактических обследованиях больших контингентов людей или для экспресс-диагностики. При положительном результате, полученном ускоренными методами, необходимо дальнейшее исследование с помощью более точного бактериологического метода.

Нитритный тест

Нитриты, являющиеся продуктами метаболизма представителей семейства энтеробактерий, могут быть обнаружены в моче с помощью реактива Грисса. Готовят два раствора: I – 1,25 г