Анализы. Полный медицинский справочник. Ключевые лабораторные исследования в одной книге - Коллектив авторов
Шрифт:
Интервал:
Закладка:
Расчет можно проводить по правилу пропорций или по калибровочному графику, для построения которого на одной оси откладывают концентрацию глюкозы (ммоль/л), а на другой – величину экстинкции.
Существуют другие методы определения уровня сахара в моче (титрационный, бродильный), которые редко применяют в практических лабораториях.
Определение уровня других видов сахаров (левулезы, лактозы, галактозы)
При необходимости пользуются различными пробами (цветные качественные, бродильные, вращение поляризованного света, образование озазонов и пр.).
Из этих проб специфическими являются только бактериальное разложение, хроматографическое исследование и энзимные пробы.
Определение уровня молочного сахара (лактозы)
Лактоза появляется в моче беременных и кормящих женщин. Положительная качественная реакция на лактозу позволяет исключить в этих случаях глюкозурию, которая обусловлена другой патологией. Лактоза дает те же реакции восстановления, что и глюкоза. Плоскость поляризации вращает вправо.
Необходимые реактивы
1. 10%-ный раствор едкого натра.
2. Аммиак (не слабее 10%).
Ход исследования
К 8–10 мл мочи приливают 4–5 мл аммиака и 5–10 капель щелочи, нагревают на водяной бане при температуре 60–70 °С. В присутствии лактозы появляется розовое окрашивание. Глюкоза дает желтое окрашивание.
Количество лактозы определяют в поляризационном аппарате. Полученный результат умножают на 0,947.
Определение фруктозы (левулезы)
Левулеза иногда встречается в моче при нарушении обмена веществ и при диабете (вместе с глюкозой).
Необходимые реактивы
1. Резорцин.
2. Соляная кислота концентрированная.
Ход исследования
Растворяют несколько зерен резорцина в 3 мл концентрированной соляной кислоты, прибавляют двойное количество мочи и быстро нагревают на водяной бане. Пробу не следует долго кипятить, так как при этом из глюкозы может образоваться левулеза. При наличии левулезы проба окрашивается в вишнево-красный цвет. Проба считается положительной при быстром появлении интенсивной окраски.
Моча, содержащая левулезу, дает все реакции на глюкозу и вращает плоскость поляризации влево. При определении ее количества в поляриметре полученный результат умножают на 0,54. Так как фруктоза большей частью встречается одновременно с глюкозой, то вращения влево обнаружить не удается.
Определение кетоновых тел
К кетоновым телам относятся ацетон, ацетоуксусная и β– оксимасляная кислоты.
В норме с мочой выделяется 20–50 мг кетоновых тел за 24 ч.
Чаще всего кетонурия наблюдается при диабете, что является критерием правильности подбора пищевого режима: если количество вводимых жиров не соответствует количеству усвояемых углеводов, то увеличивается выделение кетоновых тел. При уменьшении введения углеводов (лечение без инсулина) при обычном количестве жиров начинает выделяться ацетон; при лечении инсулином отсутствие глюкозурии достигается лучшим усвоением углеводов и не сопровождается кетонурией. Таким образом, исследование кетоновых тел в моче больных диабетом необходимо для коррекции диеты. Присутствие кетоновых тел наблюдается также при голодании, безуглеводной диете, лихорадке, у детей – при рвоте и поносе.
Кетоновые тела в моче в основном встречаются совместно, поэтому раздельное определение их клинического значения не имеет.
Большинство качественных реакций на кетоновые тела основано на их взаимодействии с нитропруссидом натрия в щелочной среде и появлении цветной реакции (образование комплексных соединений).
Унифицированная проба Ланге
Принцип метода
Нитропруссид натрия в щелочной среде реагирует с кетоновыми телами (ацетоуксусной кислотой, β-оксимасляной кислотой и ацетоном) с образованием комплекса красно-фиолетового цвета.
Необходимые реактивы
1. Раствор натрия нитропруссида готовят из Расчета 50 г/л перед употреблением.
2. Уксусная кислота концентрированная.
3. Аммиак водный (NH4OH) – 25%-ный раствор.
Ход исследования
Исследуют мочу в первые 3 ч после мочеиспускания. В пробирку к 3–5 мл мочи приливают 5–10 капель раствора натрия нитропруссида и 0,5 мл уксусной кислоты, смешивают, а затем осторожно, по стенке пробирки, пипеткой наслаивают 2–3 мл водного раствора аммиака. Пробу считают положительной, если в течение 3 мин на границе сред образуется красно-фиолетовое кольцо.
Модифицированная проба Ротеры
Принцип метода тот же, что и в пробе Ланге.
Необходимые реактивы
1. Натрия нитропруссид, раствор из Расчета 50 г/л готовят перед употреблением.
2. Аммония сульфат.
3. Аммиак водный (NH4OH) – 25%-ный раствор.
Ход исследования
Приблизительно 200 мг сухого сульфата аммония, 5 капель мочи и 2 капли раствора натрия нитропруссида тщательно смешивают в пробирке, а затем на эту смесь осторожно наслаивают 10–15 капель раствора водного аммиака. При наличии кетоновых тел на границе раздела в течение 3–5 мин образуется красно-фиолетовое кольцо, интенсивность окраски которого позволяет ориентировочно судить о концентрации кетоновых тел в моче (табл. 35).
Таблица 35
Ориентировочная количественная оценка кетоновых тел в моче
При незначительной концентрации кетоновых тел слабое кольцо может появиться на 8–10-й минуте.
Проба Легаля
Необходимые реактивы
1. Свежеприготовленный водный раствор нитропруссида натрия (5%).
2. 10–15%-ный раствор едкого натра.
3. Уксусная кислота ледяная.
Ход исследования
К 5–6 мл мочи прибавляют несколько капель водного раствора нитропруссида натрия и 0,5 мл раствора едкого натра. Получается красное окрашивание. Добавляют 0,5–1 мл ледяной уксусной кислоты.
Если красный цвет исчезает, проба отрицательная, если сохраняется – положительная. Если получается слабая розовая окраска, то проба считается также положительной.
Метод с готовым набором для экспресс-анализа ацетона в моче
Принцип метода тот же, что и в предыдущих двух пробах.
Ход исследования
На полоску фильтровальной бумаги помещают таблетку, на которую пипеткой наносят 2 капли исследуемой мочи. Через 2 мин окраску таблетки сравнивают с цветной шкалой. Наличие ацетона вызывает фиолетовое окрашивание разной интенсивности; согласно шкале реакцию оценивают как слабоположительную, положительную и резко положительную.
Ряд фирм выпускает экспресс-тесты для определения кетоновых тел; определение с помощью таких тестов проводят строго по инструкции.
Ацетоуксусная кислота в стерильной моче стабильна до 8–10 дней, при бактериурии или большом количестве дрожжевого грибка может полностью исчезнуть в течение 24 ч. Около 20% ацетона при комнатной температуре исчезает за 24 ч, но сохраняется в холодильнике.
Кетоновые тела могут исчезать из мочи и in vivo при бактериурии.
Определение желчных пигментов
Моча здоровых людей содержит минимальные количества билирубина, которые не могут быть обнаружены качественными пробами, применяемыми в практической медицине. С мочой выделяется только билирубина глюкуронид (прямой билирубин), концентрация которого в норме в крови незначительна.
Билирубинурию наблюдают главным образом при поражениях паренхимы печени (паренхиматозных желтухах) и нарушении оттока желчи (обтурационных желтухах).
Для гемолитической желтухи билирубинурия нехарактерна, так как гемобилирубин
