Большой справочник анализов - Андрей Пенделя

Определение содержания в плазме крови активированного фактора XIII как показателя циркуляции в крови тромбина. Фактор XIII, активируемый тромбином в присутствии ионов кальция, расщепляется на цепь А, обладающую фибринстабилизирующей активностью, и инертную цепь S.

Выявление активации протромбина. При активации протромбина фактором XIII происходит отщепление от субстрата одного из фрагментов, определяемого иммунологически. Нарастание содержания последнего в плазме свидетельствует об активации системы свертывания крови.

Выявление клеточных маркеров активации внутрисосудистого свертывания крови. При ДВС-синдроме и других видах блокады микроциркуляции в мелких сосудах эритроциты подвергаются травмированию, в связи с чем в мазках крови увеличивается число фрагментированных клеток (более 7–10 %).

Выявление снижения уровня в плазме крови (потребления) компонентов свертывающей, фибринолитической и калликреин-кининовой систем. При остром и подостром ДВС-синдроме отмечаются усиленные потребление и метаболизм ряда компонентов системы гемостаза, и поэтому уровень их в плазме существенно снижается. Особенно выражено подавление факторов VIII, V, антитромбина III, белков С и S, фибронектина, прекалликреина, высокомолекулярного кининогена, плазминогена. Определение некоторых из этих параметров имеет значение не столько для диагностики, сколько для оценки остроты процесса и эффективности заместительной терапии. Уровень фактора I (фибриногена) также часто снижается, что, однако, маскируется исходно повышенным содержанием его в плазме при инфекционных и иммунных заболеваниях, токсикозах беременности и других видах патологии.

Наличие продуктов деградации фибриногена наблюдается при ДВС-синдроме, болезнях печени, тромбозе, состояниях после хирургического вмешательства, лейкозе, злокачественных опухолях, почечной недостаточности, инфаркте миокарда, легочной эмболии, лечении фибринолитическими препаратами.

Выявление неоантигенов. В процессе активации факторов свертывания и фибринолиза и последующего образования их комплексов с физиологическими антагонистами возникают новые антигенные маркеры, отсутствующие отдельно в составных частях этих пар. Так, например, комплекс тромбин – антитромбин III образует антиген, не свойственный отдельно ни тромбину, ни антитромбину III. Точно так же образуется неоантиген в парном соединении плазмин – антиплазмин и т. д. При наличии антисывороток к этим неоантигенам легко установить присутствие в крови активированных ключевых ферментов свертывания крови (тромбина) и фибринолиза (плазмина).

Наблюдение за маркерами внутрисосудистого свертывания крови имеет значение для правильной оценки динамики патологического процесса, степени эффективности и достаточности проводимой терапии.

Исследование костного мозга. миелограмма

Костный мозг является основным кроветворным органом; общая масса его составляет 1,6–3,7 кг (в среднем 2,6 кг), половина ее приходится на активный красный мозг.

Красный костный мозг находится в губчатом веществе плоских костей, позвонков и метафизах длинных трубчатых костей, желтый заключен в диафизах трубчатых костей. Общий объем красного костного мозга зависит от пола, возраста, характера патологического процесса. Считается, что у женщин количество красного костного мозга меньше, чем у мужчин. У новорожденных во всех костях находится красный костный мозг. По мере роста организма красный костный мозг в трубчатых костях постепенно превращается в жировой. Начинается этот процесс в возрасте 3–4 лет и заканчивается к 14–16 годам.

Костный мозг состоит из соединительнотканной основы – стромы, представленной ретикулярной тканью, паренхимы (клетки крови) и кровеносных сосудов. Ретикулярная ткань располагается между сосудами костного мозга и костными перекладинами (балками), покрытыми эндостом (тонким соединительнотканным слоем, выстилающим костную ткань трубчатых костей изнутри), который образует фиброзную капсулу. Костный мозг богат кровеносными сосудами, проникающими из костей и образующими в нем замкнутую сеть, в которой мелкие артерии переходят непосредственно в венозные синусы (синусоиды). Стенки синусоидов состоят из ретикулярной ткани.

В венозных синусах происходит образование клеток крови, которые, достигнув зрелости, поступают в периферическую кровь. Механизм этого процесса еще не изучен. Незрелые клетки в норме задерживаются в костном мозге (по-видимому, эндотелием венозных синусов) и в периферическую кровь не поступают. В костном мозге проходит большое количество нервных волокон. Нервные окончания имеются не только в стенках сосудов, но и в ткани мозга. Раздражение симпатической части вегетативной нервной системы стимулирует созревание и выход клеток в кровь, а раздражение парасимпатической части угнетает эти процессы.

Основная функция костного мозга – кроветворная. Помимо этого костный мозг участвует в иммунобиологических и защитных процессах, костеобразовании, промежуточном, белковом, жировом, углеводном и минеральном обмене, выработке лецитина, белковых тел, депонировании фосфатидов, холестерина, аскорбиновой кислоты, а также в метаболизме железа. Кроме того, костный мозг играет роль депо крови: при необходимости он увеличивает количество циркулирующей крови на 60 %, уменьшаясь при этом на 20 %.

В костном мозге происходят процессы образования клеток крови, их дальнейшее созревание и вымывание созревших клеток в периферическую кровь. Срок жизни каждой клетки крови непродолжителен. Для эритроцитов этот срок определяется в 120–125 дней, причем период их созревания в костном мозге составляет 2–3 дня. Длительность жизни нейтрофильных гранулоцитов – 14–15 дней. Время созревания их в костном мозге – 5–6 дней, а циркулируют в кровяном русле они от 30 мин до 2 суток, 6–7 дней они находятся в тканях. Созревание лимфоцитов происходит в течение 2–3 дней, жизненный цикл составляет от 2–3 недель до 100–200 дней и даже более. Нормальная продолжительность жизни тромбоцитов – до 10 дней.

Для получения материала с целью микроскопического исследования костного мозга выполняют пункцию грудины (стернальная пункция). Также пунктируют ребра и остистые отростки позвонков (чаще всего III и IV поясничных). У детей существует опасность прокола грудины ввиду ее большей эластичности и индивидуальных различий в толщине кости, поэтому им (особенно новорожденным и грудного возраста) предпочтительно делать пункцию в верхней трети большеберцовой кости с внутренней стороны дистального эпифиза бедренной или пяточной кости. Пункцию подвздошной кости производят на 10–20 мм сзади от передней ости.

Общее количество миелокариоцитов (клеток с ядрами) колеблется от 50 до 250 × 109/л, по-видимому, вследствие неодинакового состава костного мозга в различных его участках.

При гипопластических состояниях костного мозга в мазках обнаруживается небольшое количество клеток, иногда они совсем отсутствуют. Для выяснения, является ли это следствием патологического процесса или неправильно проведенной пункции, необходимы повторные пунктирование и исследование пунктата.

Необходимость изучения гистологических препаратов костного мозга, полученного методом трепанобиопсии, возникает в тех случаях, когда при пункции не удается получить достаточное количество материала для подтверждения наличия того или иного патологического процесса.

Особое значение приобретает гистологический метод при таких заболеваниях, как лейкоз, истинная полицитемия (эритремия), остеомиелофиброз, гипопластическая анемия.

В пунктате костного мозга у здоровых людей и больных с гиперпластическими процессами обнаруживается много различий. При тяжелой форме гипопластического (апластического) процесса трепанат имеет желтый цвет, что обусловлено почти полным отсутствием костного мозга и заменой его жировой тканью.

При всех формах остеомиелофиброза и миелофиброза извлеченный кусочек костной ткани выглядит сухим и из него удается извлечь лишь очень небольшое количество костного мозга для приготовления мазков.

Миелограмма – выраженный в форме таблицы или диаграммы результат микроскопии мазка пунктата костного мозга, отражающий качественный и количественный состав ядросодержащих клеток миелоидной ткани. Значительное увеличение числа мегакариоцитов в срезах костного мозга, обычно сочетающееся с более или менее выраженным увеличением количества тромбоцитов в крови, наблюдается при эритремии, геморрагическом и эссенциальном тромбоцитозе и других миелопролиферативных заболеваниях. Умеренный мегакариоцитоз, сочетающийся с тромбоцитопенией, характерен для тромбоцитопенической пурпуры (болезни Верльгофа). При аплазии и гипоплазии костного мозга любого генеза снижено как содержание мегакариоцитов в срезах костного мозга, так и количество тромбоцитов в периферической крови. Морфологические и цитохимические изменения мегакариоцитов отмечаются при многих тромбоцитопатиях.